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M. Hamzé¹, M. Naja¹ et H. Mallat²

تحليل بيولوجي للعاملين في قطاع الأغذية في شمال لبنان

منذر حمزة، مهى نجا، حسان ملاط

الخلاصـة: تقصَّى الباحثون انتشار حالات العدوى الجرثومية والطفيلية بين العاملين في مصنع للمعجّنات في شمال لبنان، في دراسة أجريَت عام 2004. وقد وجد الباحثون أن 39% من العمال (العدد: 196) يحملون جرثومة العنقودية الذهبية في الأنف. وتبين مقاومة 98.7% من العنقوديات الذهبية المستفرَدة للبنسلين G، و24.7% لحمض الفوسيديك، و14.3% للبيفلوكساسين والتتـراسيكلين، و11.7% للإريثروميسين، و6.5% للأوكساسيللين ولكالفولانات الأموكسيسللين. ولم يمكن العثور على السلمونيلة التيفية في أي من العمال. أما الطفيليات المعوية، فقد بلغت نسبة انتشارها بين هؤلاء العمال 57.8% (العدد: 308). وكانت الأميبة موجودة لدى 72.5% منهم (86.3% متحولة قولونية، و15.5% متحولة حالة للنسج) وجاءت بعدها السوطيات (18%) (37.5% متحولة ثنائية هشَّة، و31.3% جياردية لمبلية)، ثم الممسودات (7.8%) (الصفر الخراطيني فقط). وجاء اختبار التوبركولين إيجابياً لدى 6.3% من العمال (العدد: 301).

RÉSUMÉ: Nous avons recherché la prévalence des infections bactériennes et parasitaires chez les travailleurs dans une usine de fabrication de pâtisseries au nord du Liban en 2004. Trente-neuf pour cent (39 %) des travailleurs (n = 196) avaient une colonisation par Staphylococcus aureus au niveau du nez. La résistance des isolats de S. aureus était de 98,7 % à la pénicilline G, de 24,7 % à l’acide fusidique, de 14,3 % à la pefloxacine et la tétracycline, de 11,7 % à l’érythromycine et de 6,5 % à l’oxacilline et l’amoxiclave. Salmonella typhi n’a été trouvée chez aucun des travailleurs. La prévalence des parasites instestinaux était de 57,8 % (n = 308). Les amibes représentaient 72,5 % (68,3 % Entamoeba coli, 15,5 % E. histolytica), suivies par les flagellés (18,0 %) (37,5 % Dientamoeba fragilis, 31,3 % Giardia lamblia) et les nématodes (7,8 %) (Ascaris lumbricoïdes seulement). Le test tuberculinique était positif chez 16,3 % des travailleurs (n = 301).

Biological analysis of workers in the food sector in north Lebanon

ABSTRACT : We investigated the prevalence of bacterial and parasitic infections among workers in a pastry factory in North Lebanon in 2004. We found 39% of the workers (n = 196) had nasal carriage of Staphylococcus aureus. Resistance of S. aureus isolates was 98.7% to penicillin G, 24.7% to fusidic acid, 14.3% to pefloxacine and tetracycline, 11.7% to erythromycin, 6.5% to oxacillin and amoxicillin–clavulanate. Salmonella typhi was not found in any of the workers. Prevalence of intestinal parasites was 57.8% (n = 308). Amoebae comprised 72.5% (68.3% Entamoeba coli, 15.5% E. histolytica), followed by flagellates (18.0 %) (37.5% Dientamoeba fragilis, 31.3% Giardia lamblia) and nematodes (7.8%) (only Ascaris lumbricoides). The tuberculin test was positive in 16.3% of the workers (n = 301).

¹Faculté de Santé publique, Tripoli (Liban) (Correspondance à adresser à M. Hamzé : This e-mail address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it ).
²Infectiologue, Hôpitaux du Nord du Liban ; enseignant à la Faculté de Santé publique, Tripoli (Liban).
Reçu : 06/07/06 ; accepté : 31/10/06
EMHJ, 2008, 14(6):1425-1434

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Introduction

La salubrité des aliments prend de plus en plus d’importance en santé publique. Les maladies transmises par les aliments constituent une menace considérable pour la santé humaine et l’économie des individus, des familles et des nations [1]. En 1998, l’OMS estime que 1,8 million d’enfants sont décédés dans le tiers monde (Chine exclue) à cause des diarrhées microbiennes, transmises par l’eau et les aliments contaminés [2].

Les toxi-infections alimentaires ont été nettement contrôlées par différentes mesures prophylactiques. Celles-ci comportent l’amélioration et le respect des règles d’hygiène (abattage, transport, cuisine, etc.), l’amélioration des circuits alimentaires (chaîne du froid, liaison chaude, liaison surgelée), l’éducation sanitaire du personnel de la chaîne alimentaire (tenue, hygiène corporelle, hygiène générale), une surveillance médicale du personnel, des contrôles systémiques par les organismes concernés par la santé publique [3]. À partir des résultats d’une étude cas-témoins, il a été estimé que 34 % des infections à Escherichia coli O157:H7 auraient pu être évitées par une hygiène correcte des mains avant la préparation des hamburgers [4]. Le système des points de contrôle critiques pour l’analyse des risques (HACCP) est un programme largement accepté pour la gestion de la sécurité sanitaire des aliments [5]. L’OMS a reconnu depuis fort longtemps l’importance de ce système dans la prévention des maladies infectieuses transmises par les aliments [2]. Au Liban, les maladies digestives liées à la consommation des aliments contaminés sont très répandues. Selon le ministère de la Santé, il y avait 65 cas de toxi-infections alimentaires en 2000, 92 en 2001, 125 en 2002, 68 en 2003 et 373 en 2004 [6]. Ces chiffres ne reflètent pas la réalité, par manque de déclaration et par défaut de diagnostic. En ce qui concerne la dysenterie, on constate que le ministère de la Santé au Liban a rapporté 363 cas en 2000, 2206 cas en 2001, 172 cas en 2002, 158 cas en 2003 et 143 cas en 2004.

Ce travail rapporte les résultats d’examens biologiques de dépistage chez le personnel d’une usine de fabrication de pâtisseries au nord du Liban.

Méthodes

Lieu et période de l’étude

L’étude a eu lieu dans le laboratoire de la société Kasr El Helou (la plus grande société de production et de commercialisation de pâtisseries orientales au Liban, possédant un service de médecine du travail et un laboratoire spécialisé) au nord du Liban, entre mai 2004 et fin septembre 2004. Les analyses sont effectuées chez des travailleurs adultes dont l’âge est compris entre 16 et 50 ans dans le cadre d’un bilan annuel et/ou d’un examen d’embauche.

Recherche de Salmonella typhi et des parasites dans les selles

La recherche de parasitose intestinale est obligatoire parmi les examens systématiques d’embauche et de suivi du personnel de restauration dans beaucoup de pays [7].

Au total, 308 échantillons de sel-les (260 hommes et 48 femmes) ont été recueillis dans des pots stériles ; après leur émission, ils sont transmis immédiatement au laboratoire pour être analysés. Pour la mise en évidence des S. typhi, le volume d’un pois est introduit dans un tube de sélé-nite (Biorad, France). Après incubation à 37 °C pendant 6-8 heures, un isolement est effectué sur le milieu Salmonella-Shigella (Biorad-France). Après incubation des boîtes à 37 °C pendant 18-24 heures, les colonies suspectées sont testées pour la production de l’uréase sur milieu urée-indole (bioMérieux, France) et pour la fermentation du glucose et du lactose sur le milieu de Kligler (bioMérieux, France) ; dans le cas de suspicion d’une S. typhi, une agglutination sur lame est réalisée à l’aide d’un kit antisérum Salmonella polyva-lent (T,A,B,C,Vi), commercialisé par la société Biorad-France, suivie par une identification complète par la galerie API 20 E (bioMérieux, France).

Pour la recherche des trophozoïtes vivants, nous avons utilisé la méthode de Bailenger et Faraggi [8]. Sur une lame porte-objet, on dépose une goutte de la préparation fécale. Avec le coin d’une lamelle, on mélange une petite goutte du réactif, prélevé avec une pipette Pasteur ; on recouvre la préparation avec une lamelle, ensuite on l’examine à l’objectif à immersion après avoir déposé une goutte d’huile sur la lamelle.

Une deuxième lame est préparée en mélangeant une goutte de la préparation fécale avec une goutte d’une solution de Lugol [8]. La préparation est examinée à l’objectif à immersion.

Recherche du portage nasal de Staphylococcus aureus

Cette recherche est effectuée chez 196 fonctionnaires qui manipulent des produits frais considérés à risque élevé de pullulation microbienne comme la crème fraîche orientale (peau de lait). Après un prélèvement nasal à l’aide d’un écouvillon stérile réalisé au laboratoire de la société, l’ensemencement immédiat est effectué sur une boîte de gélose au sang (Biorad-France) et sur le milieu de Chapmann (Biorad-France). Les boîtes sont ensuite incubées à 37 °C pendant 24 heures.

Les colonies suspectes sont identifiées en recherchant la présence de coagulase, en utilisant le plasma du lapin (Biorad-France), DNAse (Scharlu-Europe) et une agglutination sur lame en utilisant le kit Pastorex Staph Plus commercialisé par la société Biorad-France.

La sensibilité des différentes souches de S. aureus isolées a été déterminée par la méthode des disques. Nous avons suivi les recommandations du Comité de l’Antibiogramme de la Société française de Microbiologie (CA-SFM) [9]. Nous avons testé les antibiotiques suivants : oxacilline (5 µg), pénicilline G (6 µg), amoxi-clave (20/10 µg), gentamycine (15 µg), vancomycine (30 µg), teicoplanine (30 µg), cotrimoxazole (1,25/23,75 µg), acide fusidique (5 µg), rifampicine (30 µg), érythromycine (15 UI), minocycline (30 UI).

Intradermo-réaction à la tuberculine

Le test a été réalisé au laboratoire chez 301 personnes non vaccinées par le BCG, dont 238 hommes et 63 femmes. La technique des réactions cutanées à la tuberculine utilisée est l’intradermo-réaction à 10 unités [10,11]. Nous avons utilisé la PPD Tuberculin Mammalian, commercialisée par la société BB - NCIPD (Bulgarie), livrée en ampoules contenant la tuberculine en solution : 0,1 millilitre de solution antigéni-que (soit 10 unités de tuberculine) a été injecté par voie intradermique par l’intermédiaire d’une seringue à tuberculine à usage unique sur la face antérieure de l’avant-bras [11,12]. La lecture du test tuberculinique a été faite entre 48 et 72 heures après l’injection [13,14]. Pour mesurer le résultat du test, on a palpé avec la pulpe de l’index la papule pour en repérer les contours que l’on avait marqués au besoin au stylo marqueur à pointe fine. Le test était positif si le diamètre transversal de l’induration était supérieur à 5 mm.

Une radiographie thoracique a été effectuée pour chaque travailleur présentant un test positif.

Résultats

Recherche de salmonelles

Il n’y avait pas de résultats positifs concernant la recherche de S. typhi dans les selles.

Le tableau 1 regroupe les résultats de la recherche des parasites dans les selles de 308 personnes. La prévalence totale du portage de parasites intestinaux était de 57,8 %. Il y a lieu de signaler qu’il existait des cas de portage multiple de parasites : kystes E. coli + kystes E. histolytica (5 cas) ; kystes E. coli + D. fragilis (4 cas) ; kystes E. coli + oeufs Ascaris spp (2 cas) ; kystes E. coli + trophozoïtes E. coli + kystes E. histolytica (2 cas) ; kystes E. coli + kystes E. nana (3 cas).

Après prélèvement nasal, culture et identification des colonies suspectes isolées chez 196 personnes, le test était positif chez 77 personnes, soit un taux de portage de 39 %.

Le tableau 2 montre la sensibilité des souches isolées aux antibiotiques.

Sur les 301 personnes testées (238 hommes et 63 femmes), 49 avaient une réaction positive à la tuberculine (diamètre d’induration supérieur ou égal à 5 mm) soit 16,3 % (Tableau 3). L’examen radiologique effectué chez toutes ces personnes était normal.

Discussion

Portage de S. typhi

Dans cette étude, nous n’avons pas détecté de porteurs de S. typhi. Au Liban, la typhoïde fait partie des maladies à déclaration obligatoire. Comme toutes les maladies à transmission oro-fécale, cette maladie survient le plus souvent dans des zones où l’hygiène est précaire et frappe principalement les pays en développement d’Asie, d’Afrique ou d’Amérique latine. Les données mondiales les plus récentes font état de 17 millions de cas annuels de fièvre typhoïde et de 600 000 morts. La maladie n’a pas totalement disparu des pays industrialisés. En France métropolitaine, 75 cas ont été déclarés en 1996, 71 % d’entre eux étant causés par une contamination à l’étranger. En 1997, une épidémie qui a nécessité l’hospitalisation de 26 personnes est survenue à Utelle, dans les Alpes-Maritimes, probablement due à la consommation de charcuterie lors d’un banquet préparé par un porteur du bacille. Une autre épidémie est intervenue en 1998 à Villeneuve St Georges où, après consommation d’un repas commun, 20 personnes ont présenté une typhoïde et 95 une gastro-entérite précoce. En 2003, un foyer de sept cas groupés liés à un lieu de restauration a été détecté à Paris dans le 16e arrondissement. La source de la contamination a été identifiée : il s’agissait d’un porteur sain travaillant en cuisine. Les cas annuels en France sont inférieurs à 0,3 pour 100 000 habitants [15].

Au Liban, la fièvre typhoïde sévit de manière endémique : il y avait 750 cas déclarés de typhoïde en 2000, 580 cas en 2001, 643 cas en 2002, 891 cas en 2003 et 635 cas en 2004 [6].

Hamzé et al. ont signalé que le nord du pays reste le plus touché par ce problème [16], d’où l’importance de surveiller régulièrement les travailleurs du secteur agro-alimentaire dans ce pays.

Portage de parasites intestinaux

De nombreuses espèces de parasites appartenant à des classes très différentes peuvent coloniser le tube digestif de l’homme. Bien que certaines d’entre elles soient cosmopolites, la prévalence varie d’une région à l’autre. Cette variation est due à différents facteurs, notamment environnementaux, socio-économiques et/ou liés aux habitudes de la population. Le pouvoir pathogène de ces parasites est aussi très variable, allant d’un simple portage asymptomatique à des tableaux symptomatiques gravissimes, voire mortels. L’étude de ces parasites constitue un reflet de l’hygiène alimentaire et de la salubrité de l’eau de boisson [17,18].

Adou-Bryn et al. ont analysé 357 selles chez des enfants d’âge scolaire dans le centre de la Côte d’Ivoire. La recherche de parasites a été positive chez 139 su-jets (38,9 %). La prévalence est plus élevée chez les garçons que chez les filles. Les amibes représentent à elles seules 69,8 % des parasites rencontrés et E. coli est le plus répandu avec 22,4 % des porteurs sains. E. histolytica n’a pas été rencontré. Parmi les helminthes, Trichuris trichiura représente 25,5 % de la totalité des examens positifs, soit une prévalence de 9,5 %. Ascaris lumbricoïdes n’a pas été mis en évidence ; de plus, les auteurs ont constaté que le parasitisme intestinal à protozoaires était lié à l’hygiène corporelle et à la source d’approvisionnement en eau [19].

Une étude sur les parasitoses intestinales a été réalisée au Maroc. Elle a porté sur un échantillon de 1682 personnes, représentatif des deux milieux urbain et rural. Cette étude a montré qu’environ deux tiers des habitants du milieu rural sont parasités, alors qu’en milieu urbain environ une personne sur deux l’est. Parmi les groupes de parasites trouvés, le groupe des amibes vient en tête, suivi des flagellés puis des helminthes. Quant aux espèces pathogènes, c’est E. histolytica dans le groupe des amibes qui a été le plus fréquemment rencontré [20].

De nombreuses épidémies de diarrhées parasitaires transmises dans les collectivités après contamination d’aliments par le personnel des cuisines ont été décrites [21,22].

Le texte de référence (Arrêté du 10 mars 1977) [7], qui prévoit à l’embauche une coproculture et un examen parasitologique, reste imprécis sur les recherches parasitologiques obligatoires.

D’après le Tableau 1, on constate que la prévalence de porteurs de parasites est de 57,8 %. Ce chiffre reflète la situation au nord du Liban, où des travaux antérieurs réalisées par Araj dans la région de Beyrouth [23] et Hamzé dans la région de Tripoli [24] ont montré une prévalence élevée du portage parasitaire intestinal chez la population libanaise, tout particulièrement au nord du pays.

Portage nasal de S. aureus et sensibilité aux antibiotiques

L’étude a montré que le pourcentage des porteurs de S. aureus dans le nez était de 39 %. S. aureus est une bactérie Gram positif, ubiquitaire, que l’on trouve fréquemment sur la peau et dans les narines des gens. Il est estimé qu’entre 20 et 40 % des adultes sont des porteurs de S. aureus dans le nez, alors que 50 % d’entre eux le sont de façon intermittente [25]. Une étude au Koweït a montré un taux de portage nasal de 26,6 % chez 500 restaurateurs ; 86,6 % des souches étaient productrices d’entérotoxines [26]. Une autre étude espagnole réalisée chez 300 restaurateurs a montré un taux de portage nasal de S. aureus de 27,6 %, dont la moitié environ était productrice d’entéro-toxines [27].

L’étude de la sensibilité des souches aux antibiotiques a montré que 6,5 % étaient résistantes à l’oxacilline ; on note la présence d’une résistance importante vis-à-vis de l’acide fusidique (24,7 %), suivi par la tétracycline, la pefloxacine (14,3 % chacun) et l’érythromycine (11,7 %).

Dans l’étude de Bischoff et al, les auteurs ont constaté que 26 % des souches étaient résistantes à l’azithromycine, alors que la résistance était faible à la ciprofloxacine (1 %), la tétracycline (5 %), la mupiro-cine (1 %) et la méticilline (2 %) [28]. La résistance relativement élevée de nos souches isolées chez des porteurs sains, travaillant dans un secteur non hospitalier, peut être due à la consommation abusive non contrôlée des antibiotiques.

Récemment, des transmissions interfamiliales de souches de S. aureus résistantes à la méticilline ont été décrites, soit par contact direct avec les lésions cutanées, soit de façon indirecte à partir de divers objets expliquant alors la pérennisation de la colonisation (rasoirs, serviettes de toilette, appareil de musculation, maillots) [29].

Hamzé et al. ont rapporté, lors d’une étude sur la résistance de S. aureus au nord du Liban, une prévalence des souches résistantes à la méticilline de 30 % ; 44 % des souches étaient résistantes à la tétracycline, 36 % à l’acide fusidique, 7 % à l’érythromycine et 21 % à la pefloxacine [30].

Intradermo-réaction à la tuberculine

Les résultats obtenus dans notre étude ont montré que 16,3 % des travailleurs avaient une réaction positive. Cette prévalence était importante chez les hommes (18,5 %) par rapport aux femmes (7,9 %). Il reste à signaler que la moitié des hommes avec un test positif avaient une zone d’induration supérieure à 20 mm.

La tuberculose est toujours la 5e cause de décès par maladie dans le monde. Son incidence varie de moins de 10/100 000 habitants (Amérique du Nord) à plus de 300/100 000 habitants (Afrique subsaharienne). Elle croît avec le niveau de pauvreté et l’incidence de l’infection par le VIH [31].

La tuberculose sévit de façon endémique au Liban. Le ministère de la Santé a signalé que l’incidence générale en 2004 était de 11/100 000 habitants, alors que l’incidence des cas à examen direct positif était de 5,1/100 000 (population libanaise). En 1995, Hamzé et al. ont étudié la sensibilité tuberculinique chez 1405 écoliers – enfants et adolescents non vaccinés par le BCG – dans un secteur de la ville de Tripoli très défavorisé. Les résultats obtenus ont montré que la prévalence était de 4,3 % [32].

L’OMS, en 1990, a estimé à plus d’1,7 milliard le nombre de personnes infectées, soit le tiers de la population mon-diale (c’est-à-dire le nombre de personnes ayant fait une primo-infection et qui sont asymptomatiques). Les chiffres les plus élevés sont dans le Pacifique occidental et les plus faibles dans la Méditerranée orientale.

Lorsqu’on injecte de la tuberculine à un sujet déjà infecté par M. tuberculosis, il possède des anticorps circulants spécifiques contre les antigènes injectés et une réaction d’hypersensibilité retardée se produit. Elle se traduit après 48 heures par une réaction locale inflammatoire due à l’afflux de lymphocytes au niveau du point d’injection. Tous ces phénomènes cliniques et immunologiques observés après la contamination d’un sujet sain constituent la primo-infection tuberculeuse. Elle confère au sujet infecté un certain degré d’immunité. Dans la plupart des cas, la primo-infection tuberculeuse est asymptomatique et passe inaperçue. Elle se traduit par la conversion tuberculinique : l’intradermo-réaction à la tuberculine du sujet qui était négative avant la contamination devient positive 6 à 12 semaines après le contact infectant. Cette conversion tuberculinique est la preuve d’une infection récente et reflète l’immunité qui en résulte [31].

Un test tuberculinique montrant une induration inférieure à 5 mm est dénué de signification. Entre 5 et 10 mm, il peut s’agir soit d’une allergie postvaccinale, soit d’une infection inapparente, éventuellement due à une mycobactérie atypique. Si l’induration est supérieure à 10 mm, en l’absence de BCG antérieur, l’infection tuberculeuse est affirmée [33]. La prévalence de l’infection en fonction de l’âge dans les pays industrialisés a nettement régressé durant le XXe siècle, pratiquement tout le monde était infecté par M. tuberculosis à l’âge de 20 ans. En 1978, la proportion de personnes infectées à l’âge de 20 ans n’était que de 10 % [34]. De manière similaire, dans un pays à revenu moyen comme la Corée, la prévalence en fonction de l’âge des personnes présentant une réaction à la tuberculine égale ou supérieur à 10 mm a rapidement décru de 1965 à 1995 [35,36].

Conclusion

Ce travail a révélé que l’application du HACCP dans une industrie agro-alimentaire assure une protection certaine de la santé des consommateurs.

L’ensemble de ces analyses effectuées et les résultats obtenus renforcent ce besoin pour nos sociétés alimentaires au Liban. Il est important que le gouvernement libanais établisse des réglementations afin d’obliger ces sociétés à appliquer le système HACCP.

Il reste à signaler la nécessité de contrôler l’état de santé des fonctionnaires ainsi que le niveau d’hygiène corporelle et de détecter le portage de micro-organismes pathogènes pour les traiter. D’où l’importance d’inclure dans les grandes sociétés alimentaires un service de médecine du travail ainsi qu’un laboratoire apte à réaliser le contrôle microbiologique au niveau des matériels et des surfaces, au niveau des fonctionnaires (nez, mains, selles) et aussi au niveau des différents étapes de fabrication jusqu’aux produits finaux.

Références

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